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单抗生产中的发酵液澄清工艺 [复制链接]

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离线ningxueqin52
侠客
 

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2020-11-05
　　切向流过滤也和离心一样被广泛应用于细胞上清的收集。切向流过滤的优势在于一步就可以得到无颗粒的细胞上清，不需要额外的过滤步骤。但是在滤膜表明形成的浓缩极化层会严重影响膜的处理量，成为切向流过滤的一个主要问题。此外，由颗粒引起的不可逆的膜堵塞会降低膜的使用寿命，成为另一个主要的问题。目前有很多关于削弱浓缩极化层的研究，比如利用转动膜板来增大膜表面附近的流速，从而将浓缩极化层洗掉，还有一种方法是利用周期性地反冲洗来洗掉极化层。

　　对于切向流过滤系统而言，通量和收率是两个必须要考虑的重要因素。通量决定着处理细胞发酵液所需要的膜面积，具有重要的经济意义。通量过高会加快膜的堵塞，降低膜的寿命，所以通量的优化非常重要。膜的化学性质和孔径对于通量和可清洗能力也具有非常重要的决定性作用。此外，膜的载量即单位膜面积所处理的发酵液体积也是一个很重要的参数，需要深入优化，膜的载量优化对工艺的放大具有非常重要的意义。

　　深层过滤指的是利用多孔介质从流动相中截留固体颗粒而不是表面截留，且一般介质表面都带有正电荷，可以通过静电吸附的方式来拦截杂质颗粒。原理如图 3 所示。当流体中颗粒较多时往往使用深层过滤。深层过滤介质一般由纤维素或聚丙烯纤维柱床、过滤介质（如硅藻土）和粘合剂（用于制作平整的界面）组成。由于离心不能完全去除细胞及其碎片，而切向流成本太高，所以深层过滤通常被用于离心之后，也可以单独用于细胞发酵液的澄清。由于深层过滤介质的孔径并不均一，所以在深层过滤之后会紧接一个除菌过滤工艺，以利于色谱柱的纯化。
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